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技術(shù)文章

Technical articles

2015
10-21

ELISA加樣時(shí)移液槍的正確使用方法
大家經(jīng)常會討論移液的問題，這個(gè)步驟在ELISA實(shí)驗(yàn)中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時(shí)候是定量的，產(chǎn)生氣泡可能會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響蠻大的?？傊?，掌握微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是可以幫助您在實(shí)驗(yàn)中避免不必要的麻煩。1.加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。2.試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要注意滴加...
2015
10-14

實(shí)驗(yàn)必知:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之...
2015
10-9

實(shí)驗(yàn)新手如何獨(dú)立看懂ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
ELISA測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論，分別用“陽性”和“陰性”來表示?？梢姸ㄐ詼y定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標(biāo)本中待測抗原的多少進(jìn)行量值測定，以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定，如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。FP，hCG、細(xì)胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”的判...
2015
9-29

科研試劑使用注意事項(xiàng)
試劑是試驗(yàn)、研究開發(fā)方面*的化學(xué)物質(zhì)。但有些試劑會因操作有誤而引起意想不到的事故。這樣的試劑大體可分為具有引發(fā)火災(zāi)，爆炸的危險(xiǎn)性;因裸露而對人體產(chǎn)生傷害的有害特性;以及保管中因自然分解而引發(fā)意想不到的事故的危險(xiǎn)性。當(dāng)然，有些試劑同時(shí)具有多種危險(xiǎn)特性。因此，在使用時(shí)必須注意安全，從開封，保管，直到廢棄，希望實(shí)施責(zé)任制管理。要認(rèn)識到所有的試劑都具有“不被人知的危險(xiǎn)有害性”，防止化學(xué)事故發(fā)生?！褓徺I后，請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)。●做好預(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制?！裨谑褂们霸俅?..
2015
9-24

未使用完的96孔板試劑盒該作何處理
ELISA試劑盒包裝規(guī)格的大小取決于試劑盒里面酶標(biāo)板的規(guī)格大小，常見的有96T(12孔乘以8條)跟48T（12孔乘以4條）兩種。所以當(dāng)您在選擇ELISA試劑盒的時(shí)候考慮自己樣本的收集量再做選擇，以免造成浪費(fèi)。也許您會想剩余沒用完的板可以再保存等下次實(shí)驗(yàn)重新使用。我司技術(shù)卻不贊同該做法，不僅僅是因?yàn)榛厥盏陌遄訉竺鎸?shí)驗(yàn)會造成比較大的誤差。所以選購ELISA是應(yīng)該考慮另外兩個(gè)問題：一、經(jīng)濟(jì)：一塊96孔板，進(jìn)口的也貴不到哪去，國產(chǎn)的更便宜，你重復(fù)利用，這么一折騰，時(shí)間，精力以及洗板...
2015
9-22

如何降低ELISA試劑盒背景因素的影響
我司吳近日整理了一些相關(guān)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)，今天就說說降低ELISA試劑盒背景因素的影響建議?？蒲腥藛T來說ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和操作步驟并不陌生，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果操作不合理，也會很大程度上影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)我們是否能獲得有意義而且準(zhǔn)確的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比，背景噪音會在很大程度上影響科研人員對結(jié)果的判斷。關(guān)于如何在實(shí)驗(yàn)過程中降低ELISA試劑盒背景因素...
2015
9-16

ELISA常見問題：如何確定樣本的稀釋倍數(shù)
ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段?？墒窃谛吕鲜植僮鬟^程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題，常見問題有：1.同一個(gè)試劑盒，每次檢測樣品時(shí)，均需要帶標(biāo)準(zhǔn)品嗎？能否節(jié)約？２.如何確定樣本的稀釋倍數(shù)？3.使用標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液來稀釋嗎？我司資深技術(shù)統(tǒng)一做出如下答復(fù)：1:嚴(yán)格意義上，每次檢測樣品都要帶標(biāo)準(zhǔn)品，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線。原因是每次檢測都要受不同條件的影響，比如人為操作，環(huán)境的變化等。2：不能節(jié)約，建議您盡量把樣本同時(shí)檢測3：一般來說，ELISA是不需要稀釋...
2015
9-6

上海恒遠(yuǎn)與您分享標(biāo)本收集器材和注意事項(xiàng)
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)本的收集是一項(xiàng)很重要的步驟！在標(biāo)本的收集中需用什么器材？需注意哪些事項(xiàng)？上海恒遠(yuǎn)生物與您分享！1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-70℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，3-6月內(nèi)檢測。5.如果您的樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以...

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