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細胞破碎的技術方法
更新時間:2013-03-29 點擊次數(shù):1934

細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)產(chǎn)品的基礎。結合重組DNA技術和組織培養(yǎng)技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。

由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類細胞結成的網(wǎng)狀結構不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢。動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產(chǎn)物的目的。

化學試劑法

• 方法:某些有機溶劑如苯、甲苯、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)含物有選擇地滲透出來。SDS(十二烷基磺酸鈉是典型的陰離子表面活性劑

• 特點:提取核酸時,常用此法破碎細胞。

• 存在的問題:

a) 時間長,效率低;

b) 化學試劑毒性較強,同時對產(chǎn)物也有毒害作用

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